lunes, 20 de febrero de 2012

RETICULOCITOS-practik-



 MÉTODO AZUL DE CRESIL BRILLANTE:


GENERALIDADES:

Los reticulocitos son células jóvenes que salen de la medula ósea a la circulación con restos de retículos  compuestos de acido ribonucleico y desaparecen a las 24 horas. Los reticulocitos carecen de núcleo y contienen restos de RNA (ribosomas), que es un compuesto que se precipita en presencia de ciertos colorantes llamados “vitales”, tales como el azul de cresil brillante  (ACB), o el azul de metileno nuevo (AMN).
El número normal de reticulocitos  es de 0.2 – 2% y este refleja la producción de eritrocitos por la medula ósea  o eritropoyesis.

METODOLOGIA:
Los estudiantes se agruparan en grupo de dos y se realizará punción venosa para la determinación de reticulocitos.

MATERIALES Y REACTIVOS:
  • Microscopio
  • Laminas portaobjetos
  • Azul de cresil brillante
  • Aceite de inmersión
  • Elementos de bioseguridad y de identificación
  • Jeringas de 5 cc- torniquete
  • Laminas portaobjetos

METODO AZUL DE CRESIL BRILLANTE:
  • Azul de cresil brillante……………………  1.0  gr
  • Solución salina al 0.85% ………………..   99 ml
  • Citrato de sodio……………………………..0.4 gr


FUNDAMENTO:

Los eritrocitos recién liberados por la medula ósea tienen restos de este RNA que es precipitado por el azul de cresil brillante en forma de puntos y filamentos. Formando el complejo RNA-azul de cresil conservando la vitalidad de las células (Coloración Supravital).



PROCEDIMIENTO:

  1. Tomar un tubo y agregar partes iguales de sangre bien mezclada y solución de ACB, también pueden ser dos gotas de sangre del paciente por una gota de colorante.
  2. Mezclar varias veces y fuertemente  el tubo con la mezcla de sangre-colorante (durante 10 minutos) y se deja en reposo a temperatura ambiente  por 30 minutos ó en Baño de Maria por 15 minutos, para asegurar tiempo adecuado para colorear los reticulocitos.
  3. Mezclar la solución y se hacen dos frotis en laminas portaobjetos limpias.
  4. Contar 500 glóbulos rojos en cada una de las dos láminas y  anotar el número de reticulocitos.
  5. Promediar el número de reticulocitos y  el número de reticulocitos se reporta como porcentaje del número total de glóbulos rojos.

CALCULOS:

1-     Número de reticulocitos………………  500 glóbulos rojos
                    X………………………………..100 glóbulos rojos

2-     Recuento corregido de reticulocitos:

                                                      Hto del paciente  x % de reticulocitos
                                            RCR= ---------------------------------------------------------
                                                                        Hto normal ó Hb normal

   3- IPR (Índice de producción de reticulocitos): Es el recuento de reticulocitos corregidos   comparado con el recuento normal de 1%

                                Cifra corregida de reticulocitos del paciente
         IPR =       ----------------------------------------------------------------
                                  Cifra normal de reticulocitos

4-   Valor absoluto: Diagnóstico

                               % de reticulocitos x no de glóbulos rojos /mm3
    VA=               ------------------------------------------------------------------
                                                         100

VALORES NORMALES:

LACTANTES: 2 – 6%
NIÑOS:           0.5 – 4%
ADULTOS:     0.2 – 2.0%

Valor Absoluto: 30.000 – 100.000 / mm3


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